JM109感受态细胞

保存条件：-80℃。

1.产品简介：

本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，提取高质量DNA的理想菌株，可用于构建*，蓝白斑筛选实验。

基因型：recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17(rk - mk+ ), e14- (mcrA- ), supE44, relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

特点：1．JM109是一种琥珀抑制型F’重组缺陷菌株，带有lacZΔM15，后者使得与在λZAP中编码的β-半乳糖苷酶氨基端进行α-互补，可用于蓝白斑筛选。2． recA1和endA1的突变有利于*DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。3．支持M13噬菌体载体的生长，对转染的DNA有修饰作用，但无限制作用使用。pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg DNA，适用于高效的质粒DNA*并能保证高拷贝质粒的稳定复制。

2.使用说明：

1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。

3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。

4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。

5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12~16h。

3.注意事项：

1．刚化冻的细胞转化效率*，避免反复化冻。

2．整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用