您的单抗亚型为什么都是 IgM？
发表时间：2024-06-25
做单抗的朋友都不喜欢筛到分泌 IgM 亚型的细胞株，主要原因是 IgM 不溶于水，形成五聚体，纯化困难，实验者都对其避之不及；但是过五关斩六将筛选出来的抗体如果都是 IgM 亚型的，这个时候往往是「弃之可惜，食之扎胃」。
单抗筛选到 IgM 亚型，跟免疫的抗原性质、免疫佐剂、免疫程序和融合的试剂，甚至与动物本身都有很大的关系；以上的这些因素大部分是偶然性的因素，只对某些项目，或某个因素的偶然性有关系，一般来说排除的难度很大。做单抗行业的有一句话：「你筛选什么就得到什么？」，本文主要介绍如何让在筛选阶段就完美避开 IgM。
单抗的筛选，特别是融合之后的初次筛选，我们应用的筛选方法基本上都是间接 ELISA 方法，基本流程如下：包被抗原-细胞上清-羊抗小鼠二抗-TMB 底物显色。这个过程的基本原理是，细胞上清中的抗体与抗原结合，羊抗小鼠二抗再与抗体结合；其中的羊抗小鼠二抗是针对所有亚型的小鼠抗体的，当然包括针对 IgM 亚型的。顺着这个逻辑走下去，我们如果把二抗中针对 IgM 亚型的抗体去除，那么我们在筛选中就筛不到针对 IgM 亚型了。为了解决这个问题我们新推出的一款二抗：Frdbio○RHRP 标记羊抗小鼠 IgGs△IgM(Cat. No.SAB9010△6)，使用这个二抗进行单抗筛选得到的细胞株就不会有 IgM，只不过成本略微偏高；当然，如果我们指定要筛选某个亚型单抗可不可以？可以，我们就使用 HRP 标记羊抗小鼠独特亚型（IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3）二抗，这些二抗也是单抗抗体亚型鉴定需要用到的。
是不是有了这些二抗利器，我们的单抗筛选就是无往而不利了？显然不是，Frdbio 研发部门总结大量的案例发现，针对某些抗原的单抗无论你怎么筛选，好的抗体偏偏就是 IgM，如果非要强行用 HRP 标记羊抗小鼠 IgGs△IgM 筛选，可能什么也得不到，最后只能不甘心地选择 IgM。
如果我们的单抗亚型只能筛到 IgM，怎么办？请注意关注我们之后技术专题
