Frdbio HRP标记试剂盒的操作注意事项如下:
一、准备待标记物
1. 环境选择:待标记物应置于0.01M pH7.4的PBS环境中,以确保标记效率。
2. 避免干扰物质:待标记物中不应含有甘油、叠氮钠、氨基物质(如甘氨酸、Tris等)以及EDTA等可能影响标记效果的物质。若待标记物含有这些物质,应使用0.01M pH7.4的PBS缓冲溶液进行充分透析或超滤管超滤,以去除这些干扰物质。
二、调整待标记物浓度
1. 抗体浓度:对于抗体类待标记物,建议调整其浓度为0.5-5mg/mL,以保证标记效果。
2. 小分子物质浓度:对于小分子物质,需要实验者根据实际情况摸索合适的浓度,确保HRP的比例过量,以提高标记效率。若无法确保HRP过量,建议在标记后使用透析或过滤方法去除未标记的小分子物质。
三、操作细节
1. 标记前准备:从-20℃取出试剂盒后,应置于室温条件下平衡30分钟,使各组分充分解冻并混匀。
2. 避免气泡:在加入标记反应液和辣根过氧化物酶时,应使用移液枪反复吹打以充分混匀溶液,并避免产生气泡。
3. 反应条件:标记反应应在室温条件下避光进行,通常反应时间为3小时。
以上内容仅供参考,具体建议参看产品使用说明,或咨询厂家。